过氧化氢酶(Catalase,CAT)的酶活力检测是评估生物样品中该酶活性的重要手段,用于研究抗氧化防御机制、细胞代谢和环境污染物的影响等。以下是几种常见的过氧化氢酶活力检测方法及其特点:
1. 过氧化氢分解法
原理:过氧化氢酶催化H2O2分解为水和氧气,通过测量H2O2的消耗量或生成氧气的量来计算酶活力。
方法变体:
直接吸光度法:利用剩余H2O2与特定底物反应产生的颜色变化,如使用ABTS或4-氨基安替比林作为指示剂,吸光度变化与酶活性成正比。
气体收集法:测量在特定时间内产生的氧气量,适用于jingque测量但操作复杂。
2. Abbkine CheKine™ Catalase (CAT) Activity Assay Kit
特点:直接检测过氧化氢酶活性,不受其他过氧化物酶干扰,特异性高,操作简便,适用于血清、血浆等多种样本。
原理:基于甲醇作为底物,仅过氧化氢酶能催化其产生甲醛,甲醛与显色剂反应,吸光度与酶活性成正比。
3. 生化法检测
应用:迪信泰检测平台采用的生化法,适用于微生物学中细菌种类的鉴定,通过测定样品中过氧化氢酶活性的变化。
样本要求:确保样本量足够,周期较长,提供详细技术报告。
4. Worthington测定方法
历史与改进:传统上使用连苯三酚氧化速率,但因方法局限,后来采用4-氨基安替比林作为更安全的氢供体,通过吸光度增加来测定活性。
单位转换:定义了多种单位转换,适应不同的实验需求和条件。
5. 光度法
通用性:一种广泛使用的简单方法,通过分光光度计监测过氧化氢浓度变化,通常在510nm或520nm处测量吸光度变化。
优点:成本低,操作简便,但需注意可能的干扰物质。